Amide色譜柱是一種以羰基或氮原子為活性基團(tuán)的色譜柱，適用于相對(duì)極性較強(qiáng)的化合物分離。其獨(dú)特的表面化學(xué)性質(zhì)使得在分離有機(jī)酸、酮、核苷和藥物代謝產(chǎn)物等化合物時(shí)十分有效。然而，如何正確地進(jìn)行Amide色譜柱沖洗方法仍是廣大工作者所關(guān)注的問題。
在對(duì)Amide色譜柱進(jìn)行沖洗時(shí)，一般可以選擇純水、甲醇或醋酸乙腈的混合溶液。沖洗溶液不宜過于濃縮，一般以2-5%左右為宜，過于濃縮會(huì)加重色譜柱的堵塞程度，從而對(duì)色譜性能造成不利影響。
如果需要對(duì)極性較強(qiáng)的樣品進(jìn)行分離，則可以選擇pH較高的緩沖液，如pH=9的磷酸鹽緩沖液或pH=10的碳酸鹽緩沖液，具體選擇則要根據(jù)待分離樣品的性質(zhì)和pH值的耐受性來進(jìn)行選擇。
在進(jìn)行Amide色譜柱的沖洗時(shí)，需要首先清洗一段時(shí)間的純水或甲醇溶液，目的是將未固定或未結(jié)晶的Amide基團(tuán)沖洗掉，以免對(duì)色譜柱的分離性能造成不良影響。一般情況下，沖洗需持續(xù)1-2小時(shí)左右，至使峰形穩(wěn)定。
在進(jìn)行緩沖液沖洗時(shí)，需要控制好緩沖液的pH值，并在緩沖液和純水或甲醇溶液之間進(jìn)行緩慢的過渡，以避免對(duì)色譜柱的沖擊，從而保證色譜柱的性能。
Amide色譜柱是一種比較嬌貴的色譜柱，其沖洗方法需要特別注意以下幾點(diǎn)：
綜上所述，正確的Amide色譜柱沖洗方法對(duì)于保證色譜柱的性能、提高分析精度和降低實(shí)驗(yàn)成本都具有重要的意義。
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